Occurrence of potentially highly pathogenic free-living amoebae in ready made salads from restaurants in Jatai, Goias, Brazil

Free-living amoebae (FLA) are part of a group of protozoa found worldwide and in the most diverse environments. They resist various temperatures and disinfection methods, and are a risk to human health. Pathogenic strains grow at high temperatures and under hyperosmolarity conditions. Some FLA genera are mainly related to primary amoebic meningoencephalitis (PAM), skin ulcerations, corneal lesions, kidney and lung infections and keratitis. Therefore, studies that assess the pathogenic potential of FLA are public health issues of great concern. We aimed to evaluate the pathogenic potential of FLA isolated in salads from restaurants in vitro, using osmotolerance and thermotolerance tests. Forty-five isolates were used from ready-made salads purchased in restaurants in Jatai, Goias. Twelve isolates subjected to the osmotolerance test (26.6%) showed growth in 0.5 M mannitol, 18 (40.0%) in 1.0 M mannitol and 16 (35.5%) in 1.5 M mannitol, 13 (28.8%) isolates did not show growth. Four isolates that underwent the thermotolerance test (8.9%) showed growth at 25°C, 8 (17.8%) showed growth at 30°C, 3 (6.7%) showed growth at 37°C and 30 (66.7%) did not show growth. With the indices obtained in the present study, we concluded that 15.6% of the isolates were osmotolerant and thermotolerant. Our findings highlight a public health problem once these FLA are associated with harboring or being harbored by microorganisms responsible for diseases such as diarrhea and meningitis. Measures are required to improve food hygiene and so avoid FLA-related health problems.

The ineffectiveness of antimicrobial photodynamic therapy in the absence of preincubation of the microorganisms in the photosensitizer / A ineficácia da terapia fotodinâmica antimicrobiana na ausência da pré-incubação dos microrganismos no fotossensibilizante / La ineficacia de la terapia fotodinámica antimicrobiana en ausencia de preincubación de los microorganismos en el fotosensibilizante

Abstract Introduction: Considering its potential as an alternative therapy to combat multiresistant bacteria, photodynamic therapy has been improved and better studied in recent years, and determining its optimized application patterns is important. Objective: This study aimed to evaluate the action of antimicrobial photodynamic therapy mediated by methylene blue in the absence of preincubation of infectious agents in the photosensitizer. Method: Standard strains of Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa were used, which was or was not submitted to two methylene blue concentrations (0.1 μg/mL and 500 mg/mL) applied alone or in combination with a variety of red laser emission parameters (660 nm); in both cases, the streak was performed immediately after mixing between the photosensitizer and the solution containing the bacteria. Results: In the dishes with only methylene blue application neither antibacterial was produced, nor inhibition at the application points of the photodynamic therapy in the case of the bacterium Pseudomonas aeruginosa. However, in the cultures of Staphylococcus aureus in which laser emission was associated with the concentration of 500 mg/mL of the photosensitizer, inhibition was present at the laser application points. Conclusion: The time of exposure to the photosensitizer prior to the application of phototherapy seems to be an essential factor for the optimized action of photodynamic therapy, especially in the case of Gram-negative bacteria.

Resumo Introdução: Considerando seu potencial como forma de combate alternativo a bactérias multirresistentes, a terapia fotodinâmica vem sendo aperfeiçoada e mais bem estudada nos últimos anos, sendo importante determinar seus padrões otimizados de aplicação. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a ação da terapia fotodinâmica antimicrobiana mediada pelo azul de metileno na ausência de pré-incubação dos agentes infecciosos no fotossenbilizante. Método: Foram usadas cepas padrão de Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa, as quais foram submetidas ou não à 2 concentrações de azul de metileno (0,1 µg/mL and 500 mg/mL) aplicadas isoladamente ou em associação com variados parâmetros de emissão de laser vermelho (660 nm); em ambos os casos, a semeadura foi realizada imediatamente após a mistura entre o fotossensibilizante e a solução contendo as bactérias. Resultados: Nas placas em que houve somente aplicação de azul de metileno não houve qualquer efeito antibacteriano, assim como não houve inibição nos pontos de aplicação da terapia fotodinâmica no caso da bactéria Pseudomonas aeruginosa. No entanto, nas culturas de Staphylococcus aureus em que houve a emissão laser associada à concentração de 500 mg/ml do fotossensibilizante, houve presença de inibição nos pontos de aplicação do laser. Conclusão: Conclui-se que há indícios de que o tempo de exposição ao fotossensibilizante prévio à aplicação da fototerapia é um fator essencial para a otimização da terapia fotodinâmica, especialmente no caso de bactérias Gram-negativas.

Resumen Introducción: Considerando su potencial como forma de combate alternativo a bacterias multirresistentes, la terapia fotodinámica se ha perfeccionada y mejor estudiada en los últimos años, siendo importante determinar sus patrones optimizados de aplicación. Objetivo: El objetivo de este estudio fue evaluar la acción de la terapia fotodinámica antimicrobiana mediada por el azul de metileno en la ausencia de preincubación de los agentes infecciosos en el fotosenbilizante. Método: Se utilizaron cepas estándares de Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa, las cuales fueron sometidas o no a las 2 concentraciones de azul de metileno (0,1 μg/mL y 500 mg/mL) aplicadas aisladamente o en asociación con variados parámetros de emisión de láser rojo (660 nm); en ambos casos, la siembra fue realizada inmediatamente después de la mezcla entre el fotosensibilizante y la solución conteniendo las bacterias. Resultados: En las placas con aplicación solamente de azul de metileno no hubo ningún efecto antibacteriano, así como no hubo inhibición en los puntos de aplicación de la terapia fotodinámica en el caso de la bacteria Pseudomonas aeruginosa. Sin embargo, en los cultivos de Staphylococcus aureus en los que se produjo la emisión láser asociada a la concentración de 500 mg/mL del fotosensibilizante, hubo presencia de inhibición en los puntos de aplicación del láser. Conclusión: Se concluye que hay indicios de que el tiempo de exposición al fotosensibilizante previo a la aplicación de la fototerapia es un factor esencial para la optimización de la terapia fotodinámica, especialmente en el caso de bacterias Gram-negativas.

Candidúria em adultos e crianças: prevalência e suscetibilidade a antifúngicos em pacientes ambulatoriais de Jataí-GO / Candiduria in adults and children: prevalence and antifungal susceptibility in outpatient of Jataí-GO

Introduction: The term candiduria refers to the presence of yeast in urine and Candida albicans is the most common agent. In general, routine laboratories do not perform identification and cultivation of yeast. Objectives: To determine the prevalence of Candida species and to evaluate the antifungal susceptibility of the species isolated in urine of outpatients Jataí-GO, between January-October 2013. Material and method: Urine samples containing fungal structures were plated out on Sabouraud agar with chloramphenicol. Differentiation was taken with the urease test, nitrogen and carbon sources assimilation, germ tube test, morphology on cornmeal agar and chromogenic agar cultivation. Susceptibility was evaluated at antifungal itraconazole, fluconazole, amphotericin B and ketoconazole. Results: 1,215 urine tests were performed, and 64 had fungal structures (5.3%). Two samples were lost, thus here we considered 62 isolates. From this total, 43 were identified as C. albicans (67.2 %), eight C. glabrata (12.5 %), five C. krusei (7.8%), three C. tropicalis (4.7%), and three could not determine the species (4.7%). Amphotericin B and ketoconazole inhibited 94.9% of the isolates. On the other hand, 55.9% and 54.2 % were resistant to itraconazole and fluconazole, respectively. The resistance rates of both fluconazole and itraconazole for C. glabrata and C. albicans, as fluconazole for C. albicans and C. krusei, showed significant differences (p < 0.05). Conclusion: These data demonstrate the importance of conducting a full identification and susceptibility to antifungal agents in samples with yeast infection...

Introdução: O termo candidúria designa a presença de leveduras na urina e Candida albicans é o agente mais comum. Em geral, os laboratórios de rotina não realizam o cultivo e a identificação da levedura. Objetivos: Determinar a prevalência de espécies de Candida e avaliar o perfil de sensibilidade aos antifúngicos das espécies isoladas em urina de pacientes ambulatoriais do município de Jataí-GO, entre janeiro e outubro de 2013. Material e método: Amostras de urina que continham estruturas fúngicas foram semeadas em ágar Sabouraud com cloranfenicol. A diferenciação foi feita com provas da urease, assimilação de fontes de nitrogênio e carbono, tubo germinativo, morfologia em ágar fubá e cultivo em ágar cromogênico. Foi avaliada a sensibilidade aos antifúngicos itraconazol, fluconazol, anfotericina B e cetoconazol. Resultados: Foram realizados 1.215 exames de urina, sendo que 64 apresentaram estruturas fúngicas (5,3%). Houve perda de duas amostras, assim, considerou-se 62 isolados. Desse total, 43 foram identificadas como C. albicans (67,2%); oito, C. glabrata (12,5%); cinco, C. krusei (7,8%); três, C. tropicalis (4,7%); e em três não foi possível determinar a espécie (4,7%). Anfotericina B e cetoconazol inibiram 94,9% dos isolados. Por outro lado, 55,9% e 54,2%, respectivamente, apresentaram resistência a itraconazol e fluconazol. As taxas de resistência a itraconazol e fluconazol de C. glabrata e C. albicans e também do fluconazol entre C. albicans e C. krusei apresentaram diferenças significativas (p < 0,05). Conclusão: Os dados demonstram a importância de se realizar a identificação completa e também o antifungigrama para amostras que apresentam infecção por leveduras...

Prevalência de uropatógenos e perfil de sensibilidade aos antimicrobianos em pacientes ambulatoriais de Jataí-GO / Prevalence of uropathogens and antimicrobial susceptibility profile in outpatient from Jataí-GO

Introduction: Urinary tract infections (UTIs) affect people worldwide. Escherichia coli is the main agent of UTI, however the etiology may vary according to the age and sex of the patient. Regional variations in the prevalence and antimicrobial resistance should be considered for therapy choice. Objectives: This study aimed to conduct a survey on the main agents of UTI, and assess the resistance of these microorganisms, during the period of March 2010 to June 2012 in the city of Jataí-GO. Method: A retrospective cross-sectional study were performed, collecting data on the prevalence of uropathogens and their sensitivity profiles which were evaluated by disk diffusion method. Results: During this period, 2,181 urine cultures were evaluated, of which 510 (23.4%) were positive, predominantly female (81.4%) and aged between 21 and 64 years old (59.7%). The most frequently isolated microorganism was E. coli (61%), followed by Staphylococcus saprophyticus (9.4%), and Proteus (9.4%). The prevalence of these bacteria according to the patient sex has suffered a statistically significant change (p < 0.05). It was possible to detect high resistance rate of E. coli to some antibiotics of choice for UTI treatment, such as ampicillin (57.9 %), pipemidic acid (50.5 %), nalidixic acid (48.6 %), and trimethoprim-sulfamethoxazole (44.8%). Conclusion: These data demonstrate the need to know the reality of each region in order to establish an appropriate empirical therapy, when it is not possible to perform culture and antimicrobial susceptibility testing...

Introdução: Infecções do trato urinário (ITU) afetam pessoas em todo o mundo. Escherichia coli é o principal agente de ITU, no entanto a etiologia pode variar de acordo com o sexo e a idade do paciente. Variações regionais quanto à prevalência e à resistência aos antimicrobianos devem ser consideradas para a escolha terapêutica. Objetivos: Este trabalho teve por objetivo realizar um levantamento sobre os principais agentes de ITU e avaliar o perfil de resistência desses microrganismos no período de março de 2010 a junho de 2012, na cidade de Jataí-GO. Método: Estudo retrospectivo de corte transversal realizado por meio de coleta de dados sobre a prevalência de uropatógenos e seus perfis de sensibilidade avaliados pelo método da difusão. Resultados: Neste período, foram realizadas 2.181 uroculturas, das quais 510 (23,4%) apresentaram resultado positivo, sendo predominantemente do sexo feminino (81,4%) e com idade entre 21 e 64 anos de idade (59,7%). O microrganismo mais frequentemente isolado foi E. coli (61%), seguido de Staphylococcus saprophyticus (9,4%) e Proteus (9,4%). A prevalência dessas bactérias, de acordo com o sexo do paciente, sofreu variação estatisticamente significativa (p < 0,05). Foi possível constatar elevada taxa de resistência de E. coli para alguns antimicrobianos de primeira escolha para tratamento de ITU, como ampicilina (57,9%), ácido pipemídico (50,5%), ácido nalidíxico (48,6%) e sulfazotrim (44,8%). Conclusão: Esses dados demonstram a necessidade de se conhecer a realidade de cada região a fim de se estabelecer uma terapia empírica adequada, quando não for possível a realização da cultura e do antibiograma...

Uso de antimicrobianos pela população da cidade de Jataí (GO), Brasil / The use of antimicrobial drugs by the population in the city of Jataí, State of Goias, Brazil

Um dos fatores que contribui para a emergência de microrganismos multirresistentes é a utilização inadequada de antimicrobianos. Neste estudo foram visitados 192 domicílios para aplicação de um questionário a respeito dos hábitos de consumo de antimicrobianos de todos os moradores. Os dados revelaram que 6,8% dos participantes utilizaram antimicrobianos nos últimos meses. Os usuários eram predominantemente do sexo feminino, idade entre 20 e 59 anos e renda de 1 a 3 salário mínimos. Do total, 9,1% fizeram uso de antimicrobianos sem prescrição e 4,6% não concluíram o tratamento, alegando melhora dos sintomas ou devido aos efeitos colaterais. O motivo mais relatado para o tratamento foi infecção de orofaringe. Foi constatado também o uso de antimicrobianos de forma desnecessária, como para o tratamento de febre, gripe e alergia. Entre os entrevistados, 20,5% possuem o hábito de indicar antimicrobianos para familiares e amigos. Este trabalho foi conduzido antes da proibição legal da venda de antimicrobianos sem receita médica. Grande parte dos entrevistados desconhece os riscos da utilização inadequada e foi observado um percentual considerável de indivíduos que indicam estas drogas a outros. Com a implantação da lei que proíbe a venda sem prescrição é esperado que este problema seja minimizado.

One factor that contributes to the emergence of multidrug-resistant microorganisms is the inappropriate use of antimicrobials. In this study 192 homes were visited to apply a questionnaire regarding the consumption habits of antimicrobials of all residents. The data revealed that 6.8% of participants had used antimicrobial agents in recent months. Users were predominantly female, aged between 20 and 59, with an income of 1 to 3 minimum salaries. Of the total, 9.1% made use of antimicrobials without prescription and 4.6% did not complete the treatment cycle, citing either improvement in symptoms or side effects. The most reported reason for treatment was oropharyngeal infection. Inappropriate use of antibiotics was also detected, such as for the treatment of fever, influenza and allergy. Among the respondents, 20.5% traditionally recommend the use of antimicrobials to family and friends. This study was conducted before the prohibition of the sale of antibiotics without a prescription. The majority of respondents are unaware of the risks of inappropriate use and a considerable percentage of individuals recommend these drugs to others. With the implementation of the law prohibiting sale without prescription, it is hoped that this problem will be minimized.

Infecções do trato urinário em pacientes não hospitalizados: etiologia e padrão de resistência aos antimicrobianos / Urinary tract infections in non hospitalized patients: etiology and antibiotic resistance patterns

INTRODUÇÃO E OBJETIVO: Infecção do trato urinário (ITU) é comumente diagnosticada na prática médica, e é cada vez mais comum o isolamento de cepas resistentes em pacientes não hospitalizados. Nosso objetivo foi avaliar a frequência e a resistência dos principais uropatógenos na cidade de Presidente Prudente, SP, entre janeiro de 2006 e dezembro de 2007. MATERIAL E MÉTODOS: Nós realizamos um levantamento de dados retrospectivo sobre a etiologia e o padrão de resistência dos uropatógenos. RESULTADOS: O uropatógeno mais frequente foi E. coli (65,97 por cento). Foi encontrada diferença significativa (p < 0,05) na prevalência de E. coli de acordo com a faixa etária. Ampicilina e nitrofurantoína apresentaram, respectivamente, menor e maior poder inibitório contra enterobactérias. Porém, 88,4 por cento de Proteus mirabilis apresentaram resistência à nitrofurantoína, além de apresentar padrão de resistência mais amplo. As taxas de resistência à ceftriaxona sugerem produção de extended-spectrum beta-lactamases (ESBL). DISCUSSÃO: Nossos dados são semelhantes aos encontrados em outros estudos. É importante que esses dados sejam conhecidos pela comunidade médica local, bem como dados de estudos futuros que possam detectar mudanças na etiologia ou no padrão de resistência em nossa região. Esse monitoramento constitui importante ferramenta para atualização da terapêutica empírica. CONCLUSÃO: Os dados aqui relatados demonstram que a etiologia das infecções urinárias é semelhante à encontrada em outras partes do mundo. Porém, o padrão de resistência desses uropatógenos pode possuir características diferenciadas de acordo com o histórico de consumo de antimicrobianos em cada comunidade. Assim, é importante que dados epidemiológicos sejam periodicamente divulgados com a intenção de auxiliar a comunidade médica.

INTRODUCTION AND OBJECTIVE: Urinary tract infection (UTI) is frequently diagnosed in medical practice and the isolation of resistant strains in non-hospitalized patients is increasingly common. Our objective was to evaluate the frequency and resistance of uropathogens in the city of Presidente Prudente, Brazil, between January 2006 and December 2007. MATERIAL AND METHODS: We carried out a retrospective investigation into the etiology and resistance patterns of uropathogens. RESULTS: The most frequent uropathogen was E. coli (65.97 percent). There was a significant difference (p < 0.05) in the prevalence of E. coli according to the age group. Ampicillin and nitrofurantoin showed, respectively, smaller and larger inhibitory power against enterobacteria. However, 88.4 percent of Proteus mirabilis showed resistance to nitrofurantoin as well as wider resistance pattern. Resistance rates to ceftriaxone suggest production of ESBL. DISCUSSION: Our data are similar to those found in other studies. It is important that the local medical community should be acquainted with these findings as well as data from future studies that can detect changes in etiology or resistance pattern in our region. This monitoring is an important tool for the update of empirical therapy. CONCLUSION: The data reported herein show that the etiology of urinary infections is very similar to those found worldwide. Nonetheless, the resistance pattern of uropathogens may have different characteristics according to the history of antimicrobial consumption in each community. Thus, it is important that epidemiological data are regularly published to aid the medical community.

Aspectos sanitários em trailers de lanche no município de Presidente Prudente, SP / Sanitary aspects in trailers of snack in the local government of Presidente Prudente, SP

A necessidade de se fazer refeições fora de casa, que sejam rápidas e baratas como os lanches, faz com que os trailers sejam uma opção crescente entre a população, sendo importante conhecer a realidade de suas condições de funcionamento e da qualidade dos lanches oferecidos. Assim, 26 trailers de lanche do município de Presidente Prudente, SP, foram visitados e avaliados em seus aspectos higiênico-sanitários através do preenchimento de um roteiro de inspeção adaptado à resolução estadual SS 142/93, obtendo-se classificação de péssimo a regular para 100 por cento dos trailers. Um parâmetro entre o risco e o perigo foi comparado, coletando-se amostras dos alimentos e das mãos dos manipuladores. Foi determinado o número de coliformes fecais nos lanches tipo “x-salada”, encontrando-se em 69,23 por cento das amostras valores acima dos limites estipulados pela RDC n. 12/01 da ANVISA. Foi detectada presença da bactéria Salmonella spp em uma das amostras de molho à base de maionese. Encontraram-se ovos de Ascaris spp e larva de Nematóideo em duas amostras contaminadas por parasitas. Foram coletadas ainda, amostras “swabs” das mãos e unhas dos manipuladores dos lanches para detecção de S. aureus e Enterobactérias, encontrados em 23 por cento e 76,9 por cento das amostras, respectivamente. Nas análises de cloro residual livre e pH das águas utilizadas pelos trailers, 11,5 por cento das amostras estavam com valores de cloro abaixo do exigido pela portaria MS n. 1.469/00. Todas as amostras de água estavam adequadas quanto ao pH.

Padrão de sensibilidade de cepas de Enterobacter spp isoladas na região de Presidente Prudente-SP / Sensibility profile of strains of Enterobacter spp isolated in the region from Presidente Prudente

Enterobacter spp são considerados importantes agentes causais de infecção, especialmente em indivíduos hospitalizados. A resistência natural destes microorganismos e a grande facilidade com que desenvolvem resistência a novos antimicrobianos tornam este gênero importante objeto de estudo. Foram usadas 176 cepas isoladas de amostras clínicas diversas, isoladas de pacientes hospitalizados (Hospital Universitário Domingos Leonardo Cerávolo) e pacientes ambulatoriais (Laboratório de Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia e Bioquímica da Unoeste), ambos em Presidente Prudente-SP. E. cloacae (78,9 por cento), E. aerogenes (7,9 por cento) e E. (pantoea) agglomerans (3,9 por cento) foram mais freqüentemente isolados. Foram testados onze antimicrobianos pela técnica de difusão em ágar e cerca de 90 por cento das cepas apresentaram resistência a cefalotina, ampicilina e cefaclor. As cepas de E. (pantoea) agglomerans apresentaram perfil mais amplo de sensibilidade. Por outro lado, uma cepa de E. cloacae apresentou resistência a todos os antimicrobianos testados. Os antimicrobianos com maior poder inibitório foram imipenem e cefepima, por esta razão estes antimicrobianos seriam o tratamento de escolha em terapêutica emergencial. Esta terapia emergencial poderia ser aplicada com relativa segurança, já que foi demonstrada uma homogeneidade no padrão de sensibilidade a estes antimicrobianos, independentemente do sítio de infecção e da espécie isolada. Em nenhuma cepa foi detectada a enzima ESBL pelo teste da dupla difusão.